交感神经在针刺调节免疫反应中的作用

赵建础 赵续民 刘文琴 段学智 赵爱玲 赵岗 薛峰 张晓彬

陕西省中医药研究院 (710003)

大量的临床研究和动物实验已经证明，针刺可以双向性地调节机体的免疫功能.如升高白细胞数，增强巨噬细胞的吞噬功能，调节T、B淋巴细胞反应等；在免疫反应过强时则有抑制免疫反应的作用。在针刺调节整体免疫反应中有中枢神经系统活动环链的参与，中枢儿茶酚胺能神经元以调节细胞免疫反应为主，中枢色胺能神经元则以调节体液免疫反应为重要。但目前尚不明确针刺调节免疫反应是通过何种途径影响免疫器官及其功能的。本文目的在于用6-OHDA化学性破坏外周交感神经终末后，观察对针刺调节免疫反应的影响。

1.材料和方法

1.1 实验动物：用Balb/c小鼠，体重20.0±2.0克，雌雄兼有。由我院动物研究室提供。

1.2 分组与免疫：将小鼠随机分为4组：正常对照组，电针组，药物(6-OHDA)对照组及药物(6-OHDA)电针组。对各组小鼠于取材实验前4日，均于腹腔注射绵羊红细胞(SRBC)0.2毫升(含3亿SRBC)，预先进行免疫。

1.3 药物及用量：6-OHDA溶于0.9%生理盐水含0.1%抗坏血酸溶液中，按100mg/kg体重用量于注SRBC后48小时尾静脉注射，其余正常对照组及电针组在同一时间内尾静脉注射等量灭菌生理盐水。

1.4 电针及取材：于实验当日对各组小鼠进行固定，电针取双“承扶”穴(相当坐骨神经)30分钟，于停针后150分钟眼球放血，拉颈处死。分取脾脏、胸腺称重并制备脾、胸腺细胞悬液，分离血清。分别进行IgG、PFC、LTT及IL-2含量的测定。

1.5 检测方法：脾指数=脾重(克)/体重(克)×100；胸腺指数=胸腺重(克)/体重(克)%´ 1000；IZM含量测定用平板法。PFC用溶血分光光度法；血清IgG含量用Elisa法，以P/N值表示；LTT用3H-Tdr掺入法；IL-2含量用ConA诱导T细胞微量测定法。

2.结果

2.1正常小鼠电针30分钟后，血清IZM含量显著降低(P<0.01)；脾LTT(p<0.05)及IL-2含量(p<0.05)均显著升高。其它指标未见明显变化(表1)。

Table 1.Effect of EA on immune parameters in normal mice

** vs Control P<0.01；* VS Control P<0.05

2.2应用6-OHDA后小鼠，其脾重量、脾指数、脾细胞数、胸腺重、胸腺指数均明显减小或降低(P均<0.05或0.01)。IZM及IgG也均降低(P<0.01，<0.05)；而胸腺细胞数反见增多(P<0.01)；PFC、LTT、IL-2未见明显变化(表2)。

Table 2 Effect of 6-OHDA no immune parameters

2.3对应用6-OHDA后小鼠进行电针，发现对因6-OHDA降低的多项免疫参数如脾重、脾指数、脾细胞数、胸腺重、胸腺指数、IgG、IZM等均见恢复至正常或接近正常水平。对因6-OHDA明显增多的胸腺细胞数仍进一步增多(但未达统计意义)；对未受6-OHDA影响的LTT、IL-2含量，电针后仍呈现显著升高(P<0.05)，尤其IL-2升高更为明显(表3)。

Table 3 Effect of EA no immune parameters in axotomized mice

3.讨论

针刺具有调节整体免疫反应的功能，在这种调节作用中有中枢神经系统的参与。但其影响免疫器官或免疫功能的作用途径尚不清楚。本文则是研究交感神经支配在针刺调控免疫反应中的作用。当电针正常小鼠后，LTT及IL-2含量无显著升高，IZM含量明显下降。这进一步表明针刺对单核巨噬细胞活性及T、B淋巴细胞反应具有调节功能。

6-OHDA是一种公认的，可特异性地破坏交感神经轴索纤维，外周应用不能通过血脑屏障，故其作用是外周性的。本文应用6-OHDA后小鼠的脾重量、脾指数、脾细胞数、胸腺重及胸腺指数等多项免疫参数均明显降低；血清IZM，IgG也显著降低。PFC、IL-2及LTT未见明显变化；唯有胸腺细胞数反见明显增多。说明交感神经在维持机体整体免疫反应过程中具有重要作用。Besedovsky等曾报道，手术切除大鼠脾脏交感神经支配，或注射6-OHDA化学性切除大鼠脾脏交感神经后，脾脏PFC显著增多。但Kasahara报道了相反的结果。而我们的实验中未见PFC有明显变化，其原因尚待进一步研究。

脾脏和胸腺都是机体的重要免疫器官，二者均受交感神经支配。一般认为交感神经通过α受体使脾脏收缩，通过β2受体使其舒张。我们在实验中应用6-OHDA后脾重量的明显减小，似与脾脏的储血功能受到影响有关。这可能是由于6-OHDA使交感神经中毒，早期有肾上腺代偿性刺激作用，血内有较高的儿茶酚胺含量作用于脾，而致脾脏收缩，血液排于循环系统，脾重量减小之故。此时给予电针刺激，其减小的脾重可恢复正常。是否与电针对肾上腺功能的抑制作用有关?或者由于脾脏神经支配并不完全是交感性的，这种作用或可通过副交感神经、肽能神经以及其它体液因素共同参与有关!

有兴趣的是，我们的实验结果还表明，应用6-OHDA的多项免疫参数呈现显著降低，唯有胸腺细胞数反而明显地增多。由于胸腺同样也受交感神经支配，可能是交感神经支配对胸腺淋巴细胞的增殖，在正常时具有一种内在的制约作用。在用6-OHDA后基础上进行电针刺激，不但胸腺细胞数呈现出继续增多趋势，而且也促进T淋巴细胞的转化率及其产生的淋巴因子IL-2含量明显增高。这说明在交感神经支配阻断后，电针对其反应的调节作用更易显现出来。同时也提示交感神经的支配与T淋巴细胞系的功能调节有密切关系。这些结果对阐明针刺的神经免疫调节作用途径机理有着重要意义。