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电针对内脏痛刺激诱发的大鼠MD痛放电及其Fos蛋白表达的影响
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文章导读： |
闫丽萍 马 骋
(南京中医药大学江苏省针灸学重点实验室，中国南京 210029)
目的：探讨MD在内脏痛及针刺镇痛信息传递中的作用。
方法：分别采用玻璃微电极细胞外记录和免疫组织化学ABC法，观察MD诱发放电和Fos蛋白表达情况。1、电生理实验：健康雄性SD大鼠随机分为足三里组(77只)和对照组(71只)。足三里组选左侧足三里穴为刺激穴位，左侧外踝作为非穴位对照。用1.0寸不锈钢美容针，针间距为2～3 mm，加LH402A韩氏穴位神经刺激仪进行电针，强度2.0 mA，频率100 Hz，持续时间5 min。常规细胞外玻璃微电极记录。观察并分别记录生理状态、刺激内脏大神经、电针以及电针后即刻刺激内脏大神经等不同处理条件下MD的放电情况。实验室温度维持在24 ℃左右。实验结束后，用微电泳标记微电极记录位置，组织学再建记录位置。位置不在MD范围内的实验数据均舍去不用。统计处理以痛刺激或电针后放电脉冲数变化超过±20%为有效应的标准。实验数据用均值±标准误(x±s)表示，
进行t检验和百分率计算。2、免疫组化实验：将大鼠随机分为9组，（1）空白对照组：戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉；（2）模型对照1组：麻醉后沿腹正中线打开腹腔，备用；（3）模型1组：同模型对照1组处理后，用血管钳夹住大鼠胃窦部20 s作为内脏机械痛刺激；（4）模型2组：麻醉后胃内导入1%甲醛溶液2 mL(生理盐水配置)作为内脏化学痛刺激；（5）模型对照2组：麻醉后胃内导入与甲醛溶液等容量的温水；（6）电针足三里+模型1组：电针足三里后立即同模型1组处理；（7）电针非穴+模型1组：电针非穴后立即同模型1组处理；（8）电针足三里+模型2组：电针足三里后立即同模型2组处理；（9）电针非穴+模型2组：电针非穴后立即同模型2组处理。选穴与电针同电生理实验，电针时间为20 min。所有动物均在麻醉后2.5 h经心脏灌流取材。一抗为兔抗c-fos抗体，二抗为生物素标记的羊抗兔IgG。并设非特异性和阴性对照。每例动物取相同部位的3张切片计数Fos蛋白免疫反应细胞数，其均数作为该动物的平均Fos蛋白数。同组动物数据再作平均。
结果：（1）刺激内脏大神经可在MD诱发出痛放电；（2）电针可部分抑制内脏痛诱发的MD痛放电，并具明显的穴位特异性；（3）内脏痛并未能在MD诱导出Fos蛋白的表达，但在CNS的其它部分区域发现有Fos蛋白的表达，并且各部分的Fos蛋白数与各自的假模型组各相应区域相比均有非常显著的差异(P<0.001)。
结论：MD不仅参与内脏痛信息的传递，并且也参与针刺信息的传递。推测MD所接受的内脏痛和/或针刺信息传递可能是较为复杂的多突触传递，其镇痛作用也可能是间接的。
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