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电针对慢性情绪应激焦虑大鼠下丘脑室旁核CRH、CRH mRNA表达影响的研究
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文章导读： |
周奇志 徐海洋 吴巧凤 余曙光 彭晓华 尹海燕 魏焦禄
（成都中医药大学针灸推拿学院， 中国四川 610075）
目的：研究电针对慢性情绪应激焦虑大鼠下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素（corticotrophin-releasing hormone, CRH）及其mRNA表达的影响，探讨电针治疗焦虑的部分神经内分泌机制。
方法：选用Sprague-Dawley健康雄性大鼠，随机分为空白组、模型组、电针组3组，每组各11只。
造模方法：采用不可预知的慢性情绪应激（CES）刺激的造模方法，建立焦虑模型。于第8天起，除空白组外其他两组动物均接受21 d各种不同的应激刺激，包括电击足底、禁水、禁食、24 h光照、24 h黑暗、两笼混为一笼、单笼、倾斜、从两笼各抓两只混笼共9种应激刺激，用SPSS 11.5统计软件包transform将此9种刺激随机分配到21 d中，每天安排1种。
针刺方法：在造模的同时电针组进行电针治疗，每天15：00点开始固定大鼠，选“百会”、“三阴交”穴进行针刺。参照《实验针灸学》、《实用动物针灸手册》的动物穴位图谱定位。针刺三阴交时，单日取左侧，双日取右侧，针柄接G6805-Ⅱ型电针仪，选用疏密波，频率为14～26次/min±10%，刺激强度以大鼠针刺侧下肢轻微抖动为度。每日1次，每次15 min，连续治疗21 d。空白组和模型组均于每天15：00点进行与电针组相同的固定。
CRH和CRH mRNA含量测定：各组大鼠于实验第29 d麻醉后，剪开右心耳，快速注入100 mL生理盐水后，滴注预冷的4%多聚甲醛DEPC固定液（CEPC终浓度为0.1%）进行心脏灌注。剥取灌注后的动物脑组织，固定、常规石蜡包埋、切片。采用CRH免疫组化试剂盒检测下丘脑室旁核CRH的表达含量；采用CRH mRNA原位杂交试剂盒检测下丘脑室旁核CRH mRNA的含量。
结果：模型组的CRH和CRH mRNA含量明显高于空白组，差异有显著性（P<0.05或P<0.01）；电针组明显低于模型组（P<0.05）；与空白组相比，电针组的CRH和CRHmRNA表达无明显差异（P>0.05）。说明慢性情绪应激焦虑模型大鼠下丘脑室旁核CRH及其mRNA表达明显高于正常水平，电针具有降低焦虑大鼠CRH及其mRNA表达的作用。
结论：利用不可预知慢性情绪应激刺激可以增加大鼠下丘脑室旁核CRH及其mRNA表达；针灸具有下调CRH和CRH mRNA表达的作用。提示针灸可能通过阻断CRH与CRH mRNA之间的超短正反馈、调整CRH系统，发挥抑制焦虑作用。
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