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文章导读: |
路 玫 曹大明 李建伟
(河南中医学院,中国郑州 450008)
目的:从分子生物学水平研究针灸减轻CTX(环磷酰胺)化疗小鼠骨髓抑制,提升白细胞数量的作用机制。
方法:7周龄健康雄性昆明种小鼠32只,随机分为针刺组、艾灸组、模型组及正常组,每组8只。
造模方法:腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg/d,连续3天,第3天停药后4小时模型即成。针刺组:按照造模时间的先后,在造模完成后4小时针刺足三里、肾俞、膈俞、大椎,每天1次,进针0.2~0.3 mm,留针10 min,连续5天。艾灸组:按照造模时间的先后顺序,在造模完成后4小时,艾炷灸每天1次,每次4壮,连续5天。模型组、正常组不治疗。
血样采集:采尾静脉血,查外周血白细胞数。用颈椎脱位法处死小鼠,取双侧股骨收集细胞悬液过滤以制备单细胞悬液。检测P53基因,细胞核内表达物呈棕色为阳性;检测bcl-2、bax基因,细胞膜或者细胞质内表达物呈棕色为阳性。
结果:对外周血白细胞的影响:与模型组、正常组比较,针刺组和艾灸组均可减轻骨髓抑制、提高外周血白细胞数量。
对第5天骨髓有核细胞P53的影响:正常组<艾灸组<针刺组<模型组。针刺组和艾灸组可下调CTX化疗小鼠骨髓有核细胞P53的蛋白表达,减轻CTX使细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡。
对第5天骨髓有核细胞bcl-2的影响:正常组>艾灸组>针刺组>模型组。针刺组和艾灸组可提高CTX化疗小鼠骨髓有核细胞bcl-2蛋白表达的水平、促进细胞抵抗CTX化疗的刺激、阻止细胞凋亡发生,且艾灸组优于针刺组。
对第5天骨髓有核细胞bax的影响:正常组<艾灸组<针刺组<模型组。针刺组和艾灸组可下调CTX化疗小鼠骨髓有核细胞bax蛋白的水平,减轻化疗所致的细胞凋亡作用,且艾灸组优于针刺。
结论:针灸增加白细胞数量、减轻骨髓移植、保护造血干细胞的作用与凋亡相关基因
P53、bcl-2、bax有关。
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