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电针对束缚应激大鼠后肢骨骼肌细胞HSP 72表达的影响
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文章导读： |
冯起国
（辽宁中医药大学针灸推拿学院，中国沈阳 110032）
目的:探讨电针刺激对束缚应激大鼠后肢骨骼肌细胞中HSP 72基因表达的影响，揭示传统针刺疗法治疗应激反应类疾病的分子作用机制。
方法：选用Wister雄性大鼠18只，体重为174.1±6.4 g，8周龄，随机分为正常对照组、束缚对照组和电针刺激组，每组6只。正常对照组不做任何处理；束缚对照组用大鼠固定筒架进行束缚应激30 min，每天1次，连续7天；电针刺激组用大鼠固定筒架进行束缚应激30 min，同时施与电针刺激，选取足三里穴，疏密波，频率5/45 Hz，强度以大鼠后肢轻度颤动为度，持续30 min，每天1次，连续7天。实验第8天，用巴比妥钠腹腔麻醉，采血1~3 mL，动物处死取后肢小腿的胫骨前肌、趾长伸肌、小腿三头肌的腓肠肌和比目鱼肌、足底肌5种骨骼肌，冷冻（-84 ℃冰箱）保存。用乳酸氧化酶法测定全血乳酸值；小腿骨骼肌热休克蛋白72（HSP 72）表达用免疫印迹法检测。肌组织经匀浆、总蛋白浓度检测、热处理、电泳、转录、免疫染色后，将得到的扩增条带进行定量。
结果：①胫骨前肌的HSP72表达：针刺组HSP 72表达（226.2±28.3）与束缚组相比（156.7±13.9），有增强的趋势（P>0.05）；与正常组（100±8.7）相比，有显著的统计学差异（P<0.01）。束缚组与正常组相比也有统计学意义（P<0.01）。②趾长伸肌的HSP72表达：束缚组的诱导增强作用（583±52.8）最强，与针刺组（269.6±37.2）和正常组（100±10.6）相比，均有显著性差异（P<0.001）。而针刺组与正常组相比也有统计学意义（P<0.001）。③腓肠肌的HSP72表达：针刺组HSP72表达（633.3±103.2）与束缚组（473.4±73.7）相比，有增强趋势但无统计学差异P>0.05；与正常组（99.9±3.6）相比，有显著的统计学意义（P<0.01）。束缚组与正常组相比也有统计学意义（P<0.001）。④比目鱼肌的HSP 72表达：针刺组（143.1±9.4）与束缚组（110.4±9.1）相比有统计学意义（P<0.05）；与正常组（100±3.6）相比，有显著的统计学意义（P<0.01）。束缚组与正常组相比则无统计学差异（P>0.05）。⑤足底肌的HSP72表达：束缚组（156.5±9.6）与针刺组（131.4±13.3）相比无统计学意义（P>0.05）；与正常组（100±5.8）相比，有极显著的统计学意义（P<0.001）。针刺组与正常组相比也无统计学意义（P>0.05）。
结论：电针对大鼠后肢小腿骨骼肌HSP 72表达有极显著的诱导增强作用；电针通过增加骨骼肌细胞中HSP 72表达，改善束缚应激大鼠的应激状态，并缓解或减轻应激反应的损伤作用；表明针灸疗法对应激反应类疾病预防和治疗作用机理与HSP 72的表达密切相关。
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